產(chǎn)品關(guān)鍵詞：多聯(lián)過濾器 氮吹儀 超聲波清洗器 固相萃取裝置 漩渦混勻器 mpno.cn
[摘要] 薄膜過濾法是《中華人民共和國藥典》2000年版附錄所收載的無菌及微生物限度檢查法中的檢驗方法。近年來。在藥品檢驗中應(yīng)用日趨廣泛，具有簡便、快速、準(zhǔn)確的特點。該法在無菌檢查中可以快速集菌；在藥品微生物限度檢查中可以除去藥品中某些成分的抑菌作用；在藥品微生物檢查方法驗證和從藥物制劑中回收微生物的驗證中都可以作為實驗方法。此方法還應(yīng)用于生物制品和藥品包裝材料的無菌檢查。2005年版《中華人民共和國藥典》中又特別指出該法應(yīng)優(yōu)先采用。
薄膜過濾法是《中華人民共和國藥典》2000年版附錄[2]所收載的一種檢驗方法，是利用微孔濾膜（濾膜的孔徑應(yīng)≤0.45μm）阻截細(xì)菌，以過濾樣品中的可溶性成分，從而使樣品中污染的雜菌得以檢出的一種實驗方法，具有簡便、快速、準(zhǔn)確的特點。該法在無菌檢查中可以快速集菌。在藥品微生物限度檢查中可以除去藥品中某些成分的抑菌作用。在藥品微生物檢查方法驗證和從藥物制劑中回收微生物的驗證中都可以作為實驗方法�！吨腥A人民共和國藥典》2000年版中規(guī)定該法僅適用于有抗菌作用的或大容量的供試品。但是近年來，隨著藥品檢驗技術(shù)的發(fā)展，薄膜過濾法也得到越來越深入的研究和廣泛的應(yīng)用，不僅用于液體供試品，對于某些特殊的固體制劑或油脂性供試品，運用該法也可以取得良好的結(jié)果。國外藥典還將此法應(yīng)用于菌數(shù)測定，將經(jīng)過過濾并經(jīng)沖洗的濾膜直接貼于培養(yǎng)基瓊脂表面，待培養(yǎng)后直接計數(shù)菌落。筆者現(xiàn)對該法近年來的研究、應(yīng)用情況作綜述如下，供同行參考。 1 在藥品無菌檢查方面 1．1 抗菌藥物無菌檢查的應(yīng)用 抗菌藥物會抑制某些微生物的生長繁殖，所以用常規(guī)方法檢查會出現(xiàn)假陰性的結(jié)果，但并不等于藥品中沒有微生物甚至是致病性微生物，所以采用薄膜過濾法來去除藥品中可溶的抑菌性成分，把細(xì)菌等微生物截留在濾膜上，然后再經(jīng)過處理培養(yǎng)使所含微生物生長繁殖，從而使微生物定性或定量地檢出，以利于藥品微生物質(zhì)量控制和滅菌制劑的質(zhì)量控制。為了探討抗生素滴眼劑合理的微生物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及檢驗方法，張新妹等采用該法對5種抗生素滴眼劑進行了無菌實驗，結(jié)果5個抗生素品種18個生產(chǎn)廠家45批次的一般用途的抗生素滴眼劑無菌實驗全部符合規(guī)定，表明薄膜過濾法可用于控制菌檢查。對于《中華人民共和國藥典》2000年版的無菌檢查法不適合的品種：如新型抗真菌藥伏立康唑、丹參注射用滅菌粉末、燈盞細(xì)辛注射液、注射用雙黃連（凍干）、頭孢地尼原料等，張新妹等、唐琳錕等利用一系列實驗得出上述藥品的無菌檢查的有xiao方法為薄膜過濾法，并通過驗證實驗證明方法可行、結(jié)果可靠。張曉明等、劉雅華還利用該法進行了《抗生素品種無菌檢查*佳沖洗條件的選擇》的課題研究。對抗生素品種無菌檢查方法進行了改進，達(dá)到了快速準(zhǔn)確檢驗的目的，并為2005版《中華人民共和國藥典》的制定提供了實驗數(shù)據(jù)。 1．2非抗菌藥物無菌檢查的應(yīng)用 《中華人民共和國藥典》2000年版規(guī)定無菌檢查法中直接接種法適用于非抗菌作用的供試品。但是有一些非抗菌作用的供試品采用直接接種法后，檢查的結(jié)果卻不盡如人意，如有的注射液加入到需氧菌、厭氧菌培養(yǎng)基試管和真菌培養(yǎng)基試管后出現(xiàn)了渾濁的現(xiàn)象，致使結(jié)果不易觀察，無法判斷，還需經(jīng)接種和涂片染色后再觀察，這樣既延長了培養(yǎng)的時間又增加了污染的概率。在改用薄膜過濾法后，兩種培養(yǎng)基試管均不會出現(xiàn)渾濁，既縮短了檢驗周期又便于結(jié)果的判斷。張春瑛等用薄膜過濾法代替直接接種法對注射用阿昔洛韋、更昔洛韋、噴昔洛韋、羥基喜樹堿等共加批檢品進行了無菌檢查。實驗表明：直接接種法易出現(xiàn)假陰性，薄膜過濾法既可以消除阿昔洛韋濃度高造成的渾濁沉淀現(xiàn)象，又可以消除因藥物造成的堿性環(huán)境，有利于污染菌的生長，縮短了培養(yǎng)時間，消除了判斷誤差，提高了陽性檢出率。并建議對新藥品種出現(xiàn)不易判斷結(jié)果的情況后，應(yīng)采用薄膜過濾法替代直接接種法進行檢驗。 2 在藥品微生物限度檢查方面的應(yīng)用 《中華人民共和國藥典》（2000年版）微生物限度檢查法（附錄XIJ）收載了薄膜過濾法。并把大腸埃希菌、沙門菌、銅綠假單胞菌、破傷風(fēng)梭菌作為藥品的控制菌要求檢驗。但是如果供試品含抑菌成分，控制菌則不易檢出。近幾年國內(nèi)同行運用此法對含抑菌成分的供試品做了許多研究工作，綜述如下。 2．1抗生素滴眼劑微生物限度檢查 張新妹等采用開放式濾器將貼膜法與薄膜過濾法連用消除抗生素的活性。結(jié)果：菌落回收率>80％。45批次的抗生素滴眼劑的微生物限度符合規(guī)定。證明貼膜法用于菌落計數(shù)方法可行，薄膜過濾法可用于控制菌檢查，為2005版《中華人民共和國藥典》抗生素滴眼劑的微生物限度檢查建立了檢查方法。 2．2眼膏軟膏劑微生物限度檢查 蘇德模等在眼膏、軟膏劑微生物限度檢查法的研究中做了8個品種15批樣品的考察實驗，他們先將供試品與十四烷酸異丙酯混合的稀釋物用0.9％無菌氯化鈉溶液萃取后，取萃取液用薄膜過濾法來檢查有無微生物，結(jié)果證明該方法科學(xué)，重現(xiàn)性好，并據(jù)此提出一種新的微生物限度檢查法。 2．3 中成藥微生物限度檢查 中成藥可以運用薄膜過濾法和離心沉淀法或超聲洗菌法聯(lián)用等方法來消除某些中成藥中的抑菌作用，方法簡便易行、準(zhǔn)確可靠、重現(xiàn)性好。 2．4化學(xué)藥微生物限度檢查 對于常規(guī)方法不能檢出污染菌的藥品如：復(fù)方磺胺甲哮唑片、單硝酸阿糖腺苷、硝呋太爾等采用該法檢驗，結(jié)果均能有xiao地去除藥品中的殺菌成分，使藥品中污染的微生物得以生長，檢出率高，能較好地對細(xì)菌數(shù)、真菌數(shù)和控制菌進行檢驗。建議《中華人民共和國藥典》再版時將這種方法收載。 3 薄膜過濾法在藥品微生物驗證實驗中的應(yīng)用 王槐芾等采用薄膜過濾中和法作為中和抗菌藥物抗菌作用的方法。這種方法取決于微生物在微孔濾膜上的物理保留性如濾膜孔徑大小、濾膜對抗菌藥物的吸附作用在濾膜上回收微生物的培養(yǎng)條件。殘留在濾膜上的抗菌藥物可能對微生物的生長起抑制作用。杜平華等用薄膜過濾貼膜法對抗菌藥物進行活菌檢出率、回收率、增殖值實驗。結(jié)果：薄膜過濾貼膜法明顯高于《中華人民共和國藥典》收載的平皿菌落計數(shù)法和衛(wèi)生bu1986年頒布的《藥品衛(wèi)生檢驗方法》收載的洗脫法，貼膜法回收率平均>70％，平皿菌落計數(shù)法與洗脫法僅約為3％和<10％，貼膜法增殖差不超過1／5。結(jié)論是：貼膜法可用于含抑菌成分的藥品微生物限度的檢驗，建議《中華人民共和國藥典》收載。 4 結(jié)束語 綜上所述，薄膜過濾法是藥品檢驗中用于消除藥物中抗菌作用的一種常用的手段。薄膜過濾法把外界影響和操作者的主觀因素減少到，又增加了取樣量，所以，該方法更為客觀、公正、科學(xué)，能夠全mian反應(yīng)樣品的染菌情況。只要用來實驗的樣品是可溶解過濾的，同時又不影響樣品中微生物的生存狀態(tài)時，就可用該法檢驗。同時，該法的用途非常廣泛，幾乎可以運用到每一種劑型的藥品檢驗中去。歐洲、美國、英國、日本的藥典均有收載。我國藥檢工作者近幾年也開展了大量的有關(guān)工作，做了許多實驗研究。對于這種方法有了更深刻的認(rèn)識和更廣泛的運用，這對于在藥品檢驗技術(shù)上的提高和我國與接軌，藥品質(zhì)量控制以及藥品監(jiān)督執(zhí)fa等工作都有著重要而深遠(yuǎn)的意義。 注：本文摘自《醫(yī)藥導(dǎo)報》 作者：光新蘭，張 洪，戴鵬飛 原創(chuàng)作者：北京優(yōu)晟聯(lián)合科技有限公司 |
