使用固相萃取儀及相應(yīng)的萃取小柱對(duì)血漿中亞甲藍(lán)萃取分離,再使用分光光度法進(jìn)行測(cè)定,可以準(zhǔn)確檢測(cè)出血液中亞甲藍(lán)的含量。對(duì)血液及其成份中的病毒進(jìn)行滅活是保證輸血安全的措施,亞甲藍(lán)光化學(xué)法(MB-P法)是臨床應(yīng)用的常用方法。研究表明病毒滴度降低程度與所用的可見(jiàn)光強(qiáng)度和亞甲藍(lán)濃度有直接關(guān)系,亞甲藍(lán)存在突變的可能,若殘留量過(guò)多,血漿的外觀和色澤將明顯改變,因此必須要控制血漿中的亞甲藍(lán)濃度。 實(shí)驗(yàn)中所需樣品及儀器: 1. 樣品:血漿200ml,用MB-P法制備的病毒滅活血漿過(guò)濾前后的樣品各一份。 2. 儀器及試劑:固相萃取儀,無(wú)油隔膜真空泵,可見(jiàn)-紫外分光光度計(jì),固相萃取柱,甲醇,冰醋酸,漩渦混合器 實(shí)驗(yàn)方法: 1. 配置亞甲藍(lán)標(biāo)準(zhǔn)溶液:精密稱(chēng)取亞甲藍(lán)0.0374g(100umol)至于容量瓶中,配置成100umol/L的儲(chǔ)備液,避光密封保 存。分別取儲(chǔ)備液0.1ml,0.25ml,0.5ml,1ml,2ml,用血漿稀釋?zhuān)渲醚獫{標(biāo)準(zhǔn)溶液。 2. 萃取小柱預(yù)處理:用3ml甲醇對(duì)萃取小柱進(jìn)行活化,甲醇完全吸入后,用3ml蒸餾水沖洗甲醇。 3. 上樣:將固相萃取小柱安裝在固相萃取儀的閥門(mén)上方,然后將含有亞甲藍(lán)的血漿樣品加入到小柱中,啟動(dòng)無(wú)油隔膜真空 泵抽負(fù)壓,打開(kāi)固相萃取儀的閥門(mén),分析物吸附在萃取小柱上。 4. 淋洗:待樣品完全吸入小柱后,使用清洗劑淋洗,洗掉雜質(zhì)。 5. 洗脫:在固相萃取儀中放入干凈試管,使用洗脫劑洗脫萃取小柱中的亞甲藍(lán),然后使用漩渦混合器將試管中的洗脫液混勻。 6. 使用分光光度法測(cè)定亞甲藍(lán)的含量。 我公司用于此類(lèi)分析的產(chǎn)品: 一.USE-12S/C固相萃取裝置 技術(shù)參數(shù) 1. 向該裝置提供的真空壓力不應(yīng)大于0.1Mpa。 2. 固相萃取柱與接頭應(yīng)安裝配合好,當(dāng)發(fā)現(xiàn)系統(tǒng)總是達(dá)不到設(shè)定壓力時(shí),請(qǐng)檢查各接頭是否擰緊,氣壓蓋密封墊是否平整。 3. 玻璃器件在操作過(guò)程中請(qǐng)一定放置平穩(wěn)。 4. 系統(tǒng)配有12支流量調(diào)節(jié)閥,當(dāng)某一路不使用時(shí),可將其關(guān)閉,以保證系統(tǒng)保持一定壓力。 5. 系統(tǒng)的負(fù)壓力一般不應(yīng)超過(guò)-0.085Mpa。 主要特點(diǎn) 1. 高回收率和高富集倍數(shù) 2. 操作簡(jiǎn)單、快速、易于實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化 3. 防交叉污染、防霧化真空槽設(shè)計(jì) 4. 密封性好、一致性高 5. 無(wú)相分離操作,易于收集分析物組合,能處理小體積試樣 6. 可配大容量采樣器、快速濃縮干燥裝置、可批處理樣品 二.UVS系列漩渦混合器 主要特點(diǎn) 1. 調(diào)速范圍廣,無(wú)級(jí)調(diào)速,液晶顯示 2. 工作方式:連續(xù)/點(diǎn)動(dòng)/脈沖模式,具有定時(shí)功能 3. 外形小巧,穩(wěn)固可靠 4. 硅膠底座,超強(qiáng)防震,適于高速工作 5. 可用于試管,離心管等 6. 簡(jiǎn)單:?jiǎn)我桓咚倏蓽p少操作誤差 7. 耐用:可用于冷凍或恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)
三.固相萃取柱
關(guān)鍵詞:固相萃取儀 漩渦混合器 固相萃取柱 |